Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняется

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняется

По мнению врачей фтизиатров, формальный отказ от туберкулинодиагностики и применение названного выше метода диагностики было плохим решением. Так как эффективная экономия от внедрения этой процедуры стала важнее качества диагностики и здоровья пациента.

Несмотря на новую технологию, нельзя забывать про традиционные способы диагностики, дающие существенный эффект последнюю половину века. При их содействии получилось снизить смертность и процент заболеваемости.

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро был создан как альтернатива для туберкулинодиагностики. Однако не опробован в клинических условиях. Только по результатам обследований можно признать высокую точность диагностики процедуры.

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняетсяОснова квантиферонового теста состоит в установлении гамма-интерферона, высвобождаемого Т-лимфоцитами во время встречи с микобактерией туберкулеза. Инвитро устанавливают специфичные белки, имеющиеся в составе микобактерии человеческого туберкулеза и бычьего. С их поддержкой создаются специальные антитела. Обнаружение протеинов при содействии квантиферонового теста считается качественным показателем присутствия палочки Коха в теле человека.

При проведении процедуры также возможно обнаружение микобактериоза. Если результат диагностики положительный, то следует выполнить дифференцированное диагностирование между микобактериозом и возбудителем туберкулеза.

Как проводится

Тестирование обнаруживает наличие гамма-интерферона к протеинам. Итоговый результат устанавливается впоследствии оценки проверок с двух пробирок.

При практическом использовании квантиферонового тестирования медиками было установлено, что треть от всего народонаселения заражена микобактериями. Но лишь у 10% болезнь начинает развиваться. Неблагоприятные условия для жизни активизируют инфекцию при условии наличия слабой иммунной защитой.

В категорию высокого риска к положительному квантифероновому тесту относят:

  • работа в противотуберкулезном учреждении;
  • выходцы исправительных учреждений;
  • носители ВИЧ-инфекции;
  • граждан с сахарным диабетом;
  • проживание с больными.

Квантифероновое обследование проводится при отсутствии возможности выполнить Диаскинтест и пробы Манту, в ситуациях:

  1. при острых и соматических расстройствах, при обострении хронических заболеваний
  2. при непереносимости туберкулина
  3. при аллергических, дерматологических заболеваниях в период обострения
  4. во время карантина в организациях, которые посещает ребенок.

Ложный положительный результат пробы Манту может встречаться у человека, имеющего индивидуальную непереносимость туберкулина. Подобная характерная черта туберкулинового теста стала главной причиной отказаться от пробы.

Сходства и различия тестов на туберкулез

Сходные и отличительные черты тестов на туберкулез: Манту, квантифероновый тест, диаскинтест

  • тестирование Манту и Диаскинтест являются дерматологическими пробами, а квантифероновое обследование выполняется при заборе крови.
  • выполнение квантиферонового теста не имеет побочных эффектов
  • к туберкулинодиагностике и диаскинтесту имеются противопоказания
  • квантифероновый и диаскинтест имеют большую специфику
  • при проведении пробы Манту может встречаться ложный результат

Зависимость от времени выполнения профилактической прививки у квантиферонового тестирования отсутствует, прочие процедуры выполняются спустя месяц после БЦЖ. Беспристрастное интерпретирование результатов возможно лишь при квантифероновом тесте.

Из этого следует ряд плюсов квантиферонового теста:

  1. отсутствие ложных положительных результатов
  2. нет ограничений и противопоказаний
  3. отсутствие побочных реакций
  4. безвредность
  5. большая чувствительность и специфика.

Показания для выполнения квантиферонового теста:

  • контактирование с больным туберкулезом
  • высокая опасность контакта с возбудителем
  • положительный результат пробы Манту
  • противопоказания к проведению диаскинтеста и туберкулинодиагностики
  • обследование мигрантов.

Значение результатов теста

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняетсяПри квантифероновом тестировании не проводится разделения между активным и скрытым туберкулезом. При положительном результате необходим прием у фтизиатра, который установит последующий план лечения больного. Если установленный уровень гамма интерферона не говорит о наличии инфицирования, возможен риск скрытой фазы болезни, в этом случае необходимо вести динамическое наблюдение за пациентом.

Отрицательный результат сообщает об отсутствии инфекции в теле. Если результат положительный, то возможность присутствия болезни имеется. Если результат сомнительный. то можно предполагать чувствительность к ТВ-антигену.

Что означает положительное значение квантиферонового теста:

  • Инфицирование нетуберкулезными бактериями
  • Присутствие микобактерий туберкулеза в теле
  • Оценка при спорном значении теста
  • Плохая преаналитическая подготовленность
  • Персональная особенность иммунитета.

Если получены вышеназванные результаты, выполняется новый забор крови.

Что означает отрицательный показатель теста:

  • иммунодефицит
  • ранняя стадия заражения
  • невыполнение правил преаналитики
  • возраст до 5 лет
  • Отрицательный результат не гарантирует полное исключение заражения туберкулезом.
  • Оценивание итогов теста выполняется учитывая клинико-эпидемиологическую картину и прочие анамнестические свойства лица.

Диаскинтест

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняетсяНовый тест на туберкулез, названный диаскинтестом пришел на смену стандартной туберкулинодиагностике. Основой методики стало подкожное введение определенного количества белка, являющегося специфичным для туберкулезных микобактерий. Положительные значения говорят о том, что пациент имеет инфекцию в активной или скрытой стадии. Отрицательный показатель не гарантирует отсутствие инфекции. При выраженном иммунитете против туберкулезной микобактерии характерна негативная проба.

Однако медицинские результаты диаскинтеста считаются более точными и универсальными по сравнению с пробой Манту.

Новая методика диагностирования устанавливает тубинфицированность и основана на раскрытии ответа индивидуума на присутствие микобактерии. Исследование разработано в России и демонстрирует высокую точность.

Преимущества диаскинтеста:

  • В растворе содержатся видоспецифичные белки.
  • Высокая чувствительность.
  • Результаты более точные
  • Применяется при динамическом наблюдении за ходом лечения

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняетсяРазличие в составе препаратов теста Манту и диаскинтеста предполагает разные клинические показатели обоих тестов. Во время введения туберкулина возникают ложноположительные реакции, вызванные введением немалого числа чужеродного антигена. Диаскинтест дает положительный результат, если тело человека ранее имело дело с туберкулезными антигенами. Если проба Манту дала положительный эффект, то требуется профилактическая терапия, а это не всегда является разумным решением.

Квантифероновый тест QuantiFeron-TB, сдать анализ на туберкулез — цены в Москве в ИНВИТРО

Метод определения Твердофазный иммуноферментный анализ.

Исследуемый материал Цельная кровь (литий-гепарин)

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Активный туберкулез развивается приблизительно у 10% людей, инфицированных M. tuberculosis.

В остальных случаях благодаря иммунной системе происходит элиминация возбудителя из организма или развивается латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).

При ЛТИ микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания. 

Диагностика активного туберкулеза основывается на изучении клинических и радиографических данных в совокупности с результатами прямого микроскопического исследования, выделения культуры Mycobacterium tuberculosis, ПЦР-исследований. 

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии. 

В настоящее время существуют два метода выявления вероятной латентной инфекции: 

  • in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест); 
  • in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты). 

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента. 

В соответствии с клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях (2017), квантифероновый тест является альтернативным внутрикожным пробам методом обследования на туберкулезную инфекцию. 

Квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) основан на измерении продукции INF-γ (гамма-интерферона).

Выработка гамма-интерферона осуществляется сенсибилизированными Т-клетками крови пациента, стимулированными in vitro специфическими для микобактерий туберкулеза антигенами: кодируемые регионом RD 1 (region of difference) – ESAT-6 (early secreted antigenic target – ранний секретируемый антиген), CFP-10 (culture filtrate protein – белок клеточного фильтрата) и пептид, кодируемый RD 11 – TB7.7 (p4). Указанные антигены отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий (за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), чем достигается высокая специфичность показаний теста. 

Преимущества исследования: 

  • высокая специфичность и чувствительность; 
  • отсутствие противопоказаний; 
  • отсутствие побочных реакций; 
  • результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG. 
  • Ограничения исследования: 
  • квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез; 
  • величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный; 
  • не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ. 
Читайте также:  Слюнные железы: анатомия, особенности строения

Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. Специфичность и чувствительность данного метода не достигает 100% и может варьировать у пожилых людей, детей младше 5 лет и лиц с иммунодефицитом.

  1. Васильева Е.В., Лапин С.В., Блинова Т.В., Никитина И.Ю., Лядова И.В., Вербов В.Н., Тотолян А.А. Сравнительная ценность квантиферонового теста, неоптерина и специфических противотуберкулезных антител для клинико-лабораторной диагностики туберкулеза легких. Клиническая лабораторная диагностика. 2013;5:21-26. 
  2. Клинические рекомендации «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях». 2017:33. 
  3. Корнева Н.В., Старшинова А.А., Овчинникова Ю.Э., Потапенко Е.И., Якунова О.А., Довгалюк И.Ф. Иммунологические показатели при различной активности туберкулезной инфекции у детей. Медицинская иммунология. 2014;16(5):425-430. 
  4. Кривохиж В.Н., Королюк А.М. Латентная туберкулезная инфекция у детей: диагностика, лечение, наблюдение. 2016:562-564. 
  5. Мордовская Л.И., Аксенова В.А., Владимирский М.А., Аксенова Е.И., Ефремов Е.Е., Власик Т.Н. Количественный анализ индукции интерферона γ клетками цельной крови IN VITRO в присутствии антигенов микобактерий туберкулеза. Педиатрия. 2009;88(5):43-46. 
  6. Новые технологии в диагностике туберкулеза: Квантифероновый тест (QuantiFERON®-TB Gold IT). Главный врач, фтизиатрия. 2013;1(32):55-58. 
  7. Толемисова А.М., Сидоренко О.А., Балмахаева Р.М., Бекбенбетова З.С., Смагулова Н.К. Квантифероновый тест в диагностике туберкулеза. Вестник КазНМУ. 2015;1:330-332. 
  8. Материалы фирмы-производителя реагентов (QIAGEN).

Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)

Квантфивероновй тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.

7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M.

bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.

В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание.

При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).

К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).

Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.

Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

  • Индивидуальная непереносимость туберкулина;
  • Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
  • Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
  • Период карантина в детских коллективах.

У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.

Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции

Параметр Проба Манту Диаскинтест® Квантифероновый тест
Метод исследования Кожный тест Кожный тест Исследование крови
Побочные реакции Возможны Возможны Нет
Противопоказания Есть Есть Нет
Специфичность Низкая Высокая Высокая
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ Да Нет Нет
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок Да (не ранее чем через месяц) Да (не ранее чем через месяц) Нет
Интерпретация результатов Субъективна Субъективна Объективна

Преимущества квантиферонового теста:

  • отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
  • отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
  • безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
  • интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
  • высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).

Показания к назначению квантиферонового теста:

  • Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
  • Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
  • Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
  • Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
  • Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
  • Обследование иммигрантов.

Пример результата исследования и интерпретация:

Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный. 

Параметр Результат Критерии оценки результатов
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) 0,05 До 8,00
Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) 0,09 Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL)
Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) 9,56 От 0,50
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) Отрицательный Отрицательный

Интерпретация результатов QFT: 

Отрицательный — вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует. 

Положительный — инфекция M.tuberculosis complex вероятна. 

Сомнительный — в силу чувствительности к TB-антигену.

Интерпретация результата исследования

Положительный результат Сомнительный результат Отрицательный результат
  • Инфицирование МБТ;
  • Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).
  • Индивидуальные особенности иммунитета; 
  • Нарушение преаналитических требований.

В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований.

  • Не исключает инфицирования МБТ или туберкулеза.

Ложноотрицательные результаты могут быть:

  • В ранние сроки инфицирования;
  • При иммунодефицитных состояниях;
  • У детей < 5 лет;
  • При несоблюдении преаналитических требований.

Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.

  • Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.
  • Материал для исследования: кровь (специальный комплект из трех пробирок, который используется только для проведения исследования «Квантифероновый тест»).
  • Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.
  • Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).
  • В лабораторию CMD доставляются все 3 пробирки, помещенные в пакет «Комплект пробирок для Квантиферонового теста»!

Квантифероновый тест

[07-142] Квантифероновый тест

5950 руб.

Тест для диагностики латентной туберкулезной инфекции и активного туберкулеза, основанный на измерении интерферона-гамма, вырабатываемого сенсибилизированными Т-лимфоцитами в ответ на специфические антигены M. tuberculosis.

  • Синонимы русские
  • Интерфероновый тест на туберкулез, ИФН-гамма тест на туберкулезную инфекцию.
  • Синонимы английские
  • QuantiFERON, Interferon-gamma assay, IGRA, T-cel lassay, Interferon-γ release essay, Cytokine detection assay.
  • Какой биоматериал можно использовать для исследования?
  • Венозную кровь.
  • Общая информация об исследовании

Для диагностики латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ) в большинстве стран, в том числе и в России, используется туберкулиновая проба (проба Манту). До недавнего времени она являлась единственным методом диагностики ЛТБИ. Хотя этот метод широко распространен, он не лишен недостатков.

Так как очищенный туберкулин (ППД), используемый в реакции Манту, представляет собой смесь более 200 антигенов M.

tuberculosis, большая часть из которых идентична антигенам, входящим в состав вакцины БЦЖ и других видов микобактерий (нетуберкулезные микобактерии), на результат пробы Манту может влиять вакцинация БЦЖ в прошлом и/или наличие нетуберкулезной микобактериальной инфекции.

Кроме того, для проведения пробы Манту необходимо как минимум два обращения к врачу (постановка пробы и измерение ширины папулы через 48-72 часа), что на практике не всегда выполнимо. Для того чтобы улучшить и упростить диагностику ЛТБИ, был разработан новый метод, основанный на измерении иммунного ответа сенсибилизированных к M. tuberculosis Т-лимфоцитов. Он получил название квантифероновый тест.

При наличии ЛТБИ или активного туберкулеза в крови присутствуют сенсибилизированные к этому микроорганизму Т-лимфоциты, способные при взаимодействии с антигенами M. tuberculosis вырабатывать интерферон-гамма.

Квантифероновый тест основан на выявлении и количественном измерении вырабатываемого интерферона-гамма при добавлении венозной крови в пробирку, содержащую специфические антигены M. tuberculosis, в том числе ESAT-6 и CFP-10.

Так как в исследовании используется смесь антигенов, специфических для туберкулезной палочки, квантифероновый тест более специфичен, чем проба Манту. Он не дает ложноположительных реакций при вакцинации БЦЖ в анамнезе или при наличии нетуберкулезной микобактериальной инфекции.

Специфичность квантиферонового теста в отношении инфицирования M. tuberculosis выше, чем специфичность пробы Манту (98-100 % против 55-95 %).

Предсказательное значение положительного результата квантиферонового теста в отношении прогрессии ЛТБИ в активный туберкулез выше, чем положительного результата пробы Манту (2,8-14,3 % против 2,3-3,3 %).

Преимуществом квантиферонового теста также является и то, что для его осуществления достаточно одного обращения к врачу. Результат теста, как правило, готов через 48 часов.

Благодаря высокой информативности и легкости выполнения, квантифероновый тест находит все более широкое применение в клинической практике. Он рекомендован для диагностики как ЛТБИ, так и активного туберкулеза. Чаще его используют вместо пробы Манту, однако в некоторых случаях оба теста используются одновременно.

Использование квантиферонового теста вместо пробы Манту

Квантифероновый тест может быть использован вместо пробы Манту во всех клинических ситуациях, когда показано проведение пробы Манту в качестве теста для диагностики инфекции M. tuberculosis.

1. Использование квантиферонового теста предпочтительнее (хотя проба Манту также может применяться) в следующих случаях:

  • в группах пациентов, которые по опыт, не всегда возвращаются к врачу на второй прием для оценки результата пробы Манту (например, лица с наркотической зависимостью);
  • у пациентов, получивших вакцину БЦЖ в прошлом (для вакцинации или лечения рака).

2. Использование пробы Манту предпочтительнее (хотя квантифероновый тест также может применяться):

3. Ситуации, в которых может быть использован или квантифероновый тест, или проба Манту, без предпочтения:

  • при обследовании лиц, находившихся в контакте с пациентами с активным туберкулезом или подозрением на активный туберкулез («контактных» лиц); в случае если квантифероновый тест был проведен менее чем через 8 недель после прекращения контакта, его рекомендуется повторить через 8-10 недель после прекращения контакта — эта рекомендация заимствована из алгоритма действий при постановке реакции Манту, так как данных о сероконверсии при использовании квантиферонового теста нет; при повторном тестировании рекомендуется использовать один и тот же тест;
  • при периодическом обследовании лиц, имеющих риск заражения туберкулезом по роду деятельности (например, врачей).

Использование квантиферонового теста совместно с пробой Манту

В целом совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту не рекомендуется. Однако оно может потребоваться при получении отрицательного результата первоначального теста (квантиферонового или пробы Манту) в следующих ситуациях:

  • высокий риск инфицирования M. tuberculosis, развития активного туберкулеза и его осложнений (пациенты с ВИЧ, дети младше 5 лет);
  • присутствуют клинические симптомы, указывающие на активный туберкулез — в таком случае положительный результат повторного теста подтверждает инфекцию, а отрицательный результат первоначального теста следует считать ложноотрицательным; следует отметить, что даже многократные повторные отрицательные результаты квантиферонового теста или его комбинации с пробой Манту не позволяют полностью исключить инфекцию M. tuberculosis у таких пациентов.

Совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту может потребоваться при получении положительного результата первоначального теста (квантиферонового или пробы Манту) в следующих ситуациях:

  • когда для подтверждения инфекции требуются дополнительные данные, например при положительном результате пробы Манту у вакцинированного БЦЖ пациента — в этом случае положительный результат подтверждающего (квантиферонового) теста позволяет не только выявить ЛТБИ, но и улучшить приверженность пациента проводимому лечению;
  • в группе здоровых пациентов, имеющих низкий риск инфицирования M. tuberculosis, — как и в случае с пробой Манту, квантифероновый тест не рекомендован в группах пациентов с низким риском инфицирования M. tuberculosis; в случае если распространенность туберкулеза менее 1 %, даже если специфичность теста приближается к 99 %, большинство положительных результатов будут ложноположительными; в таком случае отрицательный результат повторного теста исключает инфекцию, а положительный результат первоначального теста следует считать ложноположительным.

Совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту может потребоваться, если результат первоначального теста неопределенный, пограничный или неинформативный.

При интерпретации результата квантиферонового теста следует учитывать следующее:

  • тест не позволяет различить ЛТБИ и активный туберкулез;
  • у пациентов с клиническими признаками активного туберкулеза положительный результат теста позволяет подтвердить инфекцию, отрицательный же результат теста у таких пациентов исключить туберкулез не позволяет;
  • у пациентов из группы низкого риска инфицирования M. tuberculosis однократный положительный результат квантиферонового теста не является доказательством инфекции; ввиду малой вероятности инфицирования в этой группе пациентов положительный результат, вероятнее всего, является ложноположительным, может быть рекомендовано повторное исследование;
  • квантифероновый тест – это непрямой метод диагностики, основанный на выявлении и измерении степени иммунного ответа пациента на M. tuberculosis; в отличие, например, от бактериологического метода (посева), квантифероновый тест не определяет сам микроорганизм, его результат в значительной степени зависит от состояния иммунной системы пациента;
  • квантифероновый тест не может быть использован в качестве основного метода диагностики ЛТБИ или активного туберкулеза. Это дополнительный тест, используемый в сочетании с анамнестическими, клиническими, другими лабораторными и инструментальными данными.

Важно отметить, что диагностическое значение квантиферонового теста до сих пор не было должным способом оценено у детей, ВИЧ-инфицированных пациентов, а также при наличии внелегочного туберкулеза. Четких рекомендаций по интерпретации результата квантиферонового теста у таких пациентов нет. Также не в полной мере исследованы феномен реверсии квантиферонового теста и его интерпретация.

Для чего используется исследование?

  • Диагностика латентной туберкулезной инфекции и активного туберкулеза.

Когда назначается исследование?

  • В качестве основного теста при профилактическом осмотре лиц, находящихся в группе риска инфицирования M. tuberculosis (медицинские работники, «контактные лица», пациенты с иммуносупрессиией – ВИЧ-инфекция, применение кортикостероидов, сахарный диабет, алкоголизм).
  • В качестве подтверждающего теста после проведения пробы Манту.
  • При наличии признаков активного туберкулеза: кашля, кровохарканья, потери веса, ночных профузных потов, стойкого субфебрилитета, рентгенологических признаков туберкулеза.
  1. Что означают результаты?
  2. Референсные значения: отрицательно.
  3. Положительный результат:
  • латентная туберкулезная инфекция (ЛТБИ);
  • активный туберкулез.

Отрицательный результат:

Что может влиять на результат?

  • Время с момента заражения M. tuberculosis. Феномен сероконверсии/реверсии квантиферонового теста изучен недостаточно.
  • Состояние иммунной системы.



Важные замечания

  • Диагностическое значение квантиферонового теста до сих пор не было должным способом оценено у детей, ВИЧ-инфицированных пациентов, а также при наличии внелегочного туберкулеза.
  • Интерпретацию результата следует проводить с учетом анамнестических, клинических, других лабораторных и инструментальных данных.
  • Также рекомендуется
  • [07-034] Mycobacterium tuberculosis, антитела
  • [09-022] Mycobacterium tuberculosis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • [09-023] Mycobacterium tuberculosis complex, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • [13-095] Определение неоптерина в сыворотке крови (диагностика туберкулеза и вирусных инфекций)
  • Кто назначает исследование?
  • Фтизиатр, терапевт, врач общей практики.
  • Литература
  1. Mazurek GH, Jereb J, Vernon A, LoBue P, Goldberg S, Castro K; IGRA Expert Committee; Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Updated guidelines for using Interferon Gamma Release Assays to detect Mycobacterium tuberculosis infection — United States, 2010. MMWR Recomm Rep. 2010 Jun 25;59(RR-5):1-25.
  2. Anochie PI, Onyeneke EC, Ogu AC, Onyeozirila AC, Aluru S, Onyejepu N, Zhang J, Efere L, Adetunji MA, Sánchez JG. Recent advances in the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis. Germs. 2012 Sep 1;2(3):110-120. Review.
  3. Zhao X, Mazlagic D, Flynn EA, Hernandez H, Abbott CL. Is the QuantiFERON-TB blood assay a good replacement for the tuberculin skin test in tuberculosis screening? a pilot study at Berkshire Medical Center. Am J Clin Pathol. 2009 Nov;132(5):678-86.
  4. Diel R, Goletti D, Ferrara G, Bothamley G, Cirillo D, Kampmann B, Lange C, Losi M, Markova R, Migliori GB, Nienhaus A, Ruhwald M, Wagner D, Zellweger JP, Huitric E, Sandgren A, Manissero D. Interferon-γ release assays for the diagnosis of latent Mycobacterium tuberculosis infection: a systematic review and meta-analysis.Eur Respir J. 2011 Jan;37(1):88-99. 

Квантифероновый тест — цены в Москве

читать далее

Квантифероновый тест (интерфероновый тест, QuantiFERON-TB, ИФН-γ тест на туберкулез) – это метод определения в крови уровня γ-интерферона, вырабатываемого сенсибилизированными к микобактериям T-лимфоцитами.

Анализ применяется как альтернатива пробе Манту для выявления скрытых или активных форм туберкулезной инфекции, в том числе для скрининга. Квантифероновый тест предполагает исследование венозной крови иммуноферментным методом.

Стоимость рассчитывается, исходя из используемых реактивов, материалов, лабораторного оборудования, учитывает трудоемкость проведения анализа.

Квантифероновый тест (интерфероновый тест, QuantiFERON-TB, ИФН-γ тест на туберкулез) – это метод определения в крови уровня γ-интерферона, вырабатываемого сенсибилизированными к микобактериям T-лимфоцитами.

Анализ применяется как альтернатива пробе Манту для выявления скрытых или активных форм туберкулезной инфекции, в том числе для скрининга. Квантифероновый тест предполагает исследование венозной крови иммуноферментным методом.

Стоимость рассчитывается, исходя из используемых реактивов, материалов, лабораторного оборудования, учитывает трудоемкость проведения анализа.

Квантифероновый тест назначается для рутинной и скрининговой диагностики различных форм туберкулеза – активного, латентного, легочного или внелегочного. Используется в качестве более современной, надежной и безопасной альтернативы традиционной пробе Манту. Проведение теста показано в следующих ситуациях:

  • Отрицательные кожные пробы на фоне ослабленной реактивности: при иммунодефицитах (включая ВИЧ-инфекцию), алиментарном истощении, гемобластозах, онкопатологии.
  • Наличие противопоказаний к туберкулинодиагностике: острых и хронических инфекций, кожных и аллергических заболеваний, индивидуальной непереносимости.
  • Подтверждение сомнительных результатов кожных тестов.
  • Ложноположительная реакция Манту после прививки БЦЖ: чтобы отличить поствакцинальные реакции и инфицированность у детей старше 5 лет.
  • Затруднительное получение результатов туберкулиновых проб: у бездомных, потребителей наркотиков, страдающих алкоголизмом.
  • Верификация инфицированности или активного туберкулеза: при положительных кожных пробах, рентгенологических изменениях, клинических признаках болезни – длительном кашле, кровохарканье, стойком субфебрилитете.
  • Отбор пациентов на иммуносупрессивную терапию: перед назначением антицитокиновых препаратов.
  • Обследование иммигрантов: повышенное внимание уделяется прибывшим их регионов с высокой заболеваемостью туберкулезом.

Квантифероновый тест считают «золотым стандартом» диагностики скрытого туберкулеза в группах риска.

К ним относят пациентов с болезнями органов дыхания и другой соматической патологией (эндокринной, аутоиммунной, почечной), проходящих лучевую и химиотерапию.

Повышенному риску инфицирования подвержены медицинские работники, отдельные категории населения: дети, подростки, пожилые, беременные, роженицы, лица, побывавшие в местах лишения свободы.

Подготовка к квантифероновому тесту

Исследование обычно назначается врачом общей практики, фтизиатром. Как биохимический анализ, квантифероновый тест предваряется несложной подготовкой со стороны пациента. Предотвратить искажение результатов позволяют следующие мероприятия:

  • Обычный пищевой режим накануне. Соблюдение специальной диеты не требуется, но обычно рекомендуют обойтись без избыточного потребления животных жиров.
  • Ночной голод. Материал на исследование берут строго натощак, чтобы после приема пищи прошло не менее 8 часов.
  • Отказ от курения. Воздержаться от сигарет придется за 30 минут до взятия крови.

Если анализ проводится впервые в виде скрининга, других подготовительных мер не предусмотрено. Когда требуется исключить либо подтвердить активную инфекцию, квантифероновый тест может осуществляться после туберкулиновых проб, врачебного осмотра, рентгенографии грудной клетки и других исследований.

Методика проведения

Принцип квантиферонового теста основан на стимуляции выработки гамма-интерферона T-лимфоцитами, ранее сенсибилизированными к антигенам микобактерий, и его количественном определении иммуноферментным методом. Исследование проходит 2 этапа – преаналитический и аналитический. Первый предполагает следующие действия:

  • Забор крови. Производится в три пробирки (с антигеном, митогеном, контрольную).
  • Перемешивание. Пробирки переворачивают несколько раз в течение 5 секунд для смешивания крови с реагентами.
  • Хранение, транспортировка. Осуществляются при температуре 20–24°C, от момента забора крови до начала исследования должно пройти не более 16 часов.
  • Инкубация. Материал находится 16 часов в термостате при температуре 37°C.
  • Центрифугирование. Для отделения плазмы от форменных элементов пробирки центрифугируют 5–15 минут.

После этого приступают непосредственно к анализу содержания интерферона методом ИФА. В лунки планшета сначала вносят плазму с конъюгатом, инкубируя на протяжении 3 часов при комнатной температуре.

Затем проводят отмывку реагента с добавлением субстрата и стоп-раствора. Исследование завершается компьютерным анализом, интерпретацией результатов.

Итоговое заключение по квантифероновому тесту делает только врач лабораторной диагностики.

Преимущества метода

Квантифероновый тест является высокоинформативным методом определения состояния клеточного иммунного ответа у людей, предположительно инфицированных или больных туберкулезом. Анализ выгодно отличается от кожных проб (Манту, Диаскинтеста), ранее считавшихся единственным методом обнаружения зараженности МБТ. Основными преимуществами квантиферонового теста являются:

  • Высокие чувствительность (89%) и специфичность (99,2%). Достигается благодаря использованию рекомбинантных антигенов, отсутствующих у M.bovis и многих нетуберкулезных микобактерий.
  • Малая вероятность ложных результатов. Анализ никак не реагирует на вакцину БЦЖ, для исключения ошибок при низкой активности лимфоцитов параллельно ставят пробу с неспецифическим митогеном.
  • Безопасность, отсутствие побочных эффектов. Анализ проводится in vitro, поэтому не сопряжен с риском индивидуальной непереносимости, аллергических реакций, активации инфекции на фоне иммуносупрессии, а также у детей.
  • Отсутствие противопоказаний. Исследование может проводиться всем лицам из группы риска, независимо от наличия сопутствующих состояний.
  • Удобство, быстрота получения результата. Требуется одно посещение врача, тест проводится за 20–24 часа.
  • Исключение субъективной оценки. Анализ и расшифровка осуществляются программно-аппаратным способом.

Метод широко внедряется в практическую фтизиатрию – включен в комплекс обязательного обследования в 78 странах, используется ведущими научно-исследовательскими центрами, диагностическими лабораториями. Проведение анализа одобрено международными и национальными клиническими рекомендациями.

Ограничения метода

Концентрация γ-ИФН не зависит от степени и стадии инфицирования, поэтому квантифероновый тест не позволяет дифференцировать активную фазу развития инфекции от латентной. Даже, несмотря на высокую чувствительность, отрицательный ответ не может полностью гарантировать отсутствие инфекции. Иногда вероятны ложноотрицательные результаты:

  • Ранние сроки инфицирования.
  • Иммунодефицитные состояния.
  • У детей до 5 лет.

Ослабление ответа возможно на фоне иммуносупрессивной терапии.

На получение сомнительных показателей влияют индивидуальные особенности иммунного ответа, нарушения, допущенные на преаналитическом этапе процедуры.

Положительные результаты квантиферонового теста бывают при инфекциях, вызванных некоторыми нетуберкулезными микобактериями. Это требует повторного тестирования или проведения дополнительных исследований.

Учитывая указанные особенности, квантифероновый тест нельзя считать самодостаточным методом диагностики туберкулеза. Чтобы подтвердить или исключить наличие инфекции, необходимо комплексное обследование. Наряду с этим стоимость анализа все еще остается высокой, а необходимость венепункции может ограничить его проведение у детей раннего возраста.

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *