Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Иммуногистохимия – это специальный анализ для определения ракового заболевания. С его помощью находят антигены, выделяемые определённым видом раковых клеток. Вдобавок с помощью иммуногистохимии прослеживается реакция антигенов на лечение. Анализ составляет основу диагностики и терапии в современной онкологии.

Как работает метод

В названии метода соединились три отрасли – иммунология, гистология и химия. Для анализа используют химические вещества. Реактивы насыщены антителами, находящими раковые антигены. Антитело – это белок, его структура притягивает антиген. Белок окрашивают ферментами, красителями, которые проявляются при положительной реакции.

Теоретические основы иммуногистохимии заложены в 40-е годы 20-го века. С помощью флуоресценции находили антигены в замороженных клетках. Затем стали использовать окрашенные ферментами антитела. Установили соответствия цветовой реакции и типа раковых клеток. Также определили гормоны и их рецепторы.

Практическое применение методов ИГХ:

  • Определение типа клеток;
  • Изучение секреторных внутриклеточных процессов и особенностей клеточного синтеза;
  • Определение гормонов и гормональных рецепторов.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что даетКлетки под микроскопом после иммуногистохимии

Виды:

  • Прямой метод – маркированные антитела соединяются с искомыми антигенами.
  • Непрямой, «антиген-антитело» – неотмеченные антитела находят антигены, потом их соединения обнаруживают вторичные отмеченные антитела.

Цвет реакции показывает статус опухоли.

Цель метода

Иммуногистохимическое исследование отвечает на три вопроса.

Что это такое

Специфический анализ помогает выяснить строение раковой клетки и идентифицировать по гистологическим признакам, к какому классу относится новообразование.

Где оно находится

Если точная локализация опухоли неизвестна, с помощью иммуногистохимии находят расположение по метастазу.

Как это лечить

С помощью анализа видна реакция антигенов на вещества препаратов химиотерапии. Так удаётся оценить, окажется ли действенным лечение указанным способом.

Установить, к каким препаратам рак устойчив, можно прежде, чем химия попадет в организм человека. Таким образом, пациента избавляют от лишней интоксикации, а сразу назначают лекарство, о действенности которого заведомо известно.

Если рак устойчив к химиотерапии, предстоит выбрать другой метод лечения.

Это помогает в лечении эстрогенозависимых опухолей при раке молочной железы.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Сложная структура железистых клеток включает признаки новообразований различной степени агрессивности. Эти опухоли бывают устойчивыми к химиотерапии и гормонам. Насколько агрессивно развивается опухоль, возможно установить по маркеру пролиферации в иммуногистохимическом тесте.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

  • Фиксация с помощью парафина.
  • Изготовление срезов.
  • Распределение срезов по стеклам.
  • Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах.

Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль. Важно сохранить материал, так как опухоли бывают размером до 1 см. По результатам теста строится программа лечения.

Впрочем, в этом случае иммуногистохимия обладает преимуществом.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что даетРабота с материалом биопсии

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

  • Требуется минимум биоматериала и реактивов;
  • Определяет рак на ранней стадии;
  • Быстрый результат;
  • Точность и достоверность.

Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней.

По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза.

На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов.

Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении.

Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.

Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Применение метода в диагностике

Показания к анализу:

  • Патологии репродуктивной системы, бесплодие;
  • Активный опухолевый рост любой локализации.

Противопоказаний к анализу нет. Порой невозможно получить биоматериал для исследования из-за расположения опухоли.

Иммуногистохимия эндометрия – важное исследование для нахождения причин бесплодия. Его цель – найти антиспермальные клетки, препятствующие оплодотворению.

Причиной бесплодия становится нечувствительность эндометрия к гормонам во время овуляции. При этом показатели гормонального фона в норме, антиспермальных тел нет.

Иммуногистохимическая диагностика выявляет, что проблема в рецепторах эндометрия.

Трудно поддаются диагностике тимомы. Их деление на злокачественные и доброкачественные условно. Всё зависит от конкретного случая. Статус опухоли вилочковой железы, тимуса показывает исследование на антитела.

ИГХ при раке прямой кишки применяется, чтобы установить эпителиальный или эндокринный характер опухоли, наследственный фактор и прогноз. Методика определяет первичное ли заболевание и метастазы.

Расшифровка результатов основана на показателе степени злокачественности. Чем он выше, тем менее благоприятный прогноз. Патология – 85% содержания маркера, означает последнюю стадию заболевания с метастазами. Менее 10% – норма, благополучный исход лечения.

Другие маркерные методы

Онкологический диагноз всё же редко ставят по результатам единственного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ – гистология. Метод отличается от иммуногистохимии тем, что даёт представление только о клеточном строении. Гистологическим способом выделяют в одном материале несколько различных структур, к примеру, аденокарциномы. Злокачественное образование формируется из железистой ткани, которое выделяет жидкость.

Исходя из типа жидкости, выделяют серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином располагаются фолликулярно или папиллярно. Опухоль бывает твердой или с включениями цист, и уже классифицируется как цистаденокарцинома.

Об этих характеристиках узнают по результатам гистологического исследования и корректируют лечение под конкретный тип опухоли.

Технология такая же, как при иммуногистохимии. Берут материал с помощью биопсии, покрывают парафином и разрезают образец на тонкие пластины. Готовые препараты также окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования – длительные сроки ожидания результата планового анализа, 10-14 дней. Срочный анализ делают за 30 мин.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что даетОкрашенный препарат для изучения

Метод МГМ

Ещё один анализ, в основе которого лежит реакция на маркеры – молекулярно-генетический. Помогает установить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, влияющие на её метастатическую и инвазивную активность, а также наличие наследственной предрасположенности или спорадической, спонтанной природы образования.

Гистология и иммуногистохимия – два основных метода постановки диагноза при раке, подтверждающие друг друга. Разница в результатах редка, так как иммуногистохимия включает исследование клеточного строения.

Часто после гистологического исследования лимфоузла пациента дополнительно направляют на иммуногистохимию. Под микроскопом материал изучает эксперт, который может что-то упустить. Либо структуру сложно идентифицировать. Метод ИГХ – помощь в спорной ситуации.

Лаборатории и стоимость

В России есть лаборатории, где можно сделать тест на иммуногистохимию.

Лаборатория компании «ЮНИМ», Инновационный центр Сколково, Москва – 28300 р. любой сложности, 19000 при раке молочной железы, срок 3 дня.

Лаборатория «Мелайн-Сервис», Москва:

  • 6560 р. анализ на 1 антитело;
  • 15980 р. анализ мягкотканных опухолей 6-10 антител;
  • 27350 р. сложный анализ на 11-14 антител;
  • 12620 р. – стандартное исследование молочной, предстательной железы, определение статуса эндометрия, 2-5 антител.

Центр молекулярной диагностики в Москве и с филиалами в регионах РФ:

  • 5170 р. – 1 антитело;
  • 12500 р. – 5 антител;
  • 24000 р. – 10 антител.

Стоимость зависит от сложности исследования и вида рака.

Иммуногистохимическое исследование

Иммуногистохимические исследования или иммуногистохимия (сокращенно ИГХ) — это анализ, который применяется для диагностики различных заболеваний и нашел особенно широкое применение в онкологии. С помощью него обнаруживают маркеры — вещества (белки), которые в больших количествах вырабатываются опухолевыми клетками. Это помогает врачам решать различные диагностические задачи.

Суть исследования ИГХ в том, что к образцу опухолевой ткани добавляют антитела, которые распознают искомое вещество как антиген и связываются с ним. Благодаря этому соответствующие участки опухолевой ткани окрашиваются, и их можно обнаружить при исследовании под микроскопом.

ИГХ — относительно простой, недорогой и в то же время очень эффективный метод диагностики, это незаменимый инструмент для врачей-онкологов при многих типах рака. Вы можете пройти иммуногистохимию в Москве в клинике Медицина 24/7.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Для чего применяют анализ ИГХ в онкологии?

Врачам-онкологам иммуногистохимия помогает решать следующие задачи:

  • Уточнить диагноз, вид и подвид злокачественной опухоли, если этого не позволяет сделать цитологическое и гистологическое исследование. Например, существует около 70 разновидностей лимфом и лейкозов. Чаще всего их диагностируют с помощью иммуногистохимии. Иногда дополнительно требуется проведение молекулярно-генетического исследования.
  • Выявить природу и локализацию основной опухоли, если удалось обнаружить только отдаленные метастазы, и неясно их происхождение.
  • Подобрать оптимальную схему терапии. С помощью иммуногистохимического анализа можно оценить чувствительность злокачественной опухоли к тем или иным лекарственным препаратам, обнаружить «молекулярные мишени» для противоопухолевых средств.
  • Оценить степень злокачественности опухолевых клеток, прогноз.
  • Дифференциальная диагностика: исследование помогает отличить злокачественные опухоли от доброкачественных новообразований, неопухолевых процессов.
  • Диагностировать множественные опухоли. Иммуногистохимию рака применяют, когда у пациента имеется подозрение на одновременное наличие двух и более разных типов злокачественных опухолей.
Читайте также:  Как уменьшить объем бедер и ягодиц: упражнения для уменьшения бедер, попы в домашних условиях

Как проводят анализ?

Для того чтобы провести исследование на различные опухолевые маркеры, врач должен выполнить биопсию — получить фрагмент ткани злокачественной опухоли и отправить его в лабораторию.

Там материал особым образом подготавливают (с помощью парафинизации или заморозки), обрабатывают соответствующими антителами и изучают под микроскопом.

Иммуногистохимия опухолей позволяет не только выявить искомое вещество, но и оценить его локализацию в ткани, судить о количестве.

После того как исследование завершено, лечащий врач получает из лаборатории заключение. Сроки проведения анализа установлены пунктом 24 Приказа Минздрава России № 179н от 24 марта 2016 г. Если опухолевую ткань исследуют на 5 разных маркеров или меньшее количество, результат должен быть готов в течение одной недели, если на большее количество — в течение 15 дней.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

При каких типах рака чаще всего применяют иммуногистохимические исследования?

Иммуногистохимическое исследование биопсийного материала помогает выявлять разные виды опухолевых маркеров. Вот некоторые:

  • При раке молочной железы: рецепторы к гормонам (эстрогенам, прогестерону), белок-рецептор HER2.
  • При карциноидах (нейроэндокринных опухолях): рецепторы к гормону соматостатину типов 2А и 5.
  • При немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) и некоторых других типах рака: PD-L1, ROS1, ALK.
  • При раке толстой кишки и некоторых других злокачественных опухолях: микросателлитная нестабильность.

Иммуногистохимические исследования при раке молочной железы

При раке молочной железы самое большое значение имеют три белка: рецептор к эстрогенам, рецептор к прогестерону и HER2.

Присутствие этих молекул на поверхности раковых клеток делает их чувствительными к определенным лекарственным препаратам.

Если по результатам иммуногистохимии ни одна из этих молекул не обнаружена, диагностируют тройной негативный рак молочной железы. Он отличается более агрессивным течением, его сложнее лечить.

  • ER (рецептор эстрогенов) связывается с женскими половыми гормонами и стимулирует деление опухолевых клеток. У таких пациентов эффективны гормональные препараты, которые блокируют эффекты эстрогенов.
  • PR (рецептор прогестерона) связывается с гормоном прогестероном и приводит к аналогичному эффекту. Не существует лекарственных препаратов, которые были бы направлены против PR, однако, определение этого белка помогает правильно оценить прогноз.
  • HER2 — белок из семейства рецепторов эпидермального фактора роста. Если на поверхности клеток присутствует большое его количество, это стимулирует их бесконтрольные деления. Рецептор HER2 можно заблокировать с помощью таргетного препарата трастузумаба (Герцептина).

В лаборатории содержание этих веществ в опухолевых клетках оценивают с помощью специальных шкал:

ER и PR HER2
Результаты:

  • 0 — нет окрашенных клеток.
  • 1+ — 1% или менее окрашенных клеток.
  • 2+ — 1–10% окрашенных клеток.
  • 3+ — 10% или более окрашенных клеток.
Результаты:

  • 0 — менее 10% слабоокрашенных клеток.
  • 1+ — слабое частичное окрашивание более чем 10% клеток.
  • 2+ — окрашивание более чем 10% клеток, от слабого до умеренного.
  • 3+ — сильное, полное окрашивание более 10% клеток.
Интерпретация результата:

  • 0 — отрицательный.
  • 1–2 — неопределенный.
  • 3 — положительный.
Интерпретация результата:

  • 0–1 — отрицательный.
  • 2 — неопределенный, необходимы дополнительные анализы.
  • 3 — положительный результат, пациент является кандидатом на лечение трастузумабом.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Иммуногистохимические исследования при раке легкого

При раке легкого с помощью иммуногистохимии можно уточнить гистологический тип злокачественной опухоли. Разные подтипы клеток при немелкоклеточном раке легкого могут экспрессировать различные маркеры:

  • Большинство аденокарцином (злокачественные опухоли из клеток, вырабатывающих слизь): цитокератин 7 (СК7), тиреоидный транскрипционный фактор-1 (TTF-1), опухолевый белок p63, цитокератин 20 (CK20), опухолевый белок p63, Е-кадгерин.
  • Плоскоклеточный рак (из плоского эпителия, который выстилает дыхательные пути): CK5/6, p63, 34bE12. TTF-1 и CK7 при плоскоклеточном раке легкого обычно не обнаруживают.

Также анализ иммуногистохимии при раке легкого может потребоваться для обнаружения продуктов «неправильных» генов, которые могут стать мишенями для таргетных препаратов. Это помогает разобраться, стоит ли назначить пациенту данные препараты:

  • EGFR — рецептор эпидермального фактора роста, который находится на поверхности опухолевых клеток и заставляет их бесконтрольно размножаться. В данном случае могут быть эффективны таргетные препараты: эрлотиниб (Тарцева), афатиниб (Гилотриф), гефитиниб (Иресса), осимертиниб (Тагриссо), дакомитиниб (Визимпро), нецитумумаб (Portrazza).
  • ALK — мутация в этом гене встречается при немелкоклеточном раке легкого примерно в 5% случаев. Применяют таргетные препараты: кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), алектиниб (Алекенза), бригатиниб (Алунбриг), лорлатиниб (Лорбрена).
  • ROS1 — ген, мутации в котором возникают при немелкоклеточном раке легкого в 1–2% случаев. При этом помогают такие таргетные препараты, как кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), лорлатиниб (Лорбрена), энтректиниб (Розлитрек).
  • PD-L1 — белок, который связывается с молекулой PD1 на поверхности T-лимфоцитов, подавляет их активность, мешает атаковать опухолевые клетки. Если в опухолевой ткани обнаружен этот маркер, могут быть назначены иммунопрепараты из группы ингибиторов контрольных точек.

Иммуногистохимическое исследование при раке матки

Иммуногистохимия эндометрия помогает выявить некоторые важные опухолевые маркеры:

  • Рецепторы к эстрогенам (ER) и прогестерону (PR): играют важную роль в прогнозе и выборе тактики лечения.
  • Маркеры пролиферативной активности (интенсивности деления опухолевых клеток): антиген Ki-67, ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA). По пролиферативной активности опухоли можно косвенно судить о степени ее злокачественности, прорастании в соседние ткани, наличии отдаленных метастазов.
  • Маркеры апоптоза — запрограммированной клеточной смерти. В этом процессе принимают участие многие молекулы, если он нарушается, то клетка становится «бессмертной» и может бесконтрольно размножаться. Наибольшее значение имеют опухолевые маркеры: bax, bcl-2, c-myc, р53, с-erb B-2HER-2
    eu.
  • Маркеры ангиогенеза — вещества, которые свидетельствуют о том, что злокачественная опухоль активно «выращивает» для себя новые кровеносные сосуды. В качестве маркеров используют антигены CD31 и CD34, VIII фактор свертывания крови.
  • Снижение активности гена PTEN. В норме белок, который он кодирует, должен останавливать размножение клеток и запускать апоптоз — запрограммированную клеточную смерь. При предраковых состояниях и раке эндометрия (слизистой оболочки матки) активность этого белка зачастую снижена.

Иммуногистохимия рака молочной железы: как проходит и что дает

Иммуногистохимические исследования при раке толстой кишки

Некоторые опухолевые маркеры, определяемые с помощью иммуногистохимии, помогают диагностировать колоректальный рак при метастазах с неизвестной локализацией первичной опухоли:

  • Ядерный транскрипционный фактор CDX2 высоко специфичен для клеток кишечного эпителия.
  • VIL1 — специфичен для аденокарцином желудочно-кишечного тракта.
  • GPA33 — ген, кодирующий белок, который экспрессируется в большинстве случаев при колоректальном раке.
  • SATB2 — белок, обладающий высокой специфичностью и являющийся хорошим маркером первичного и метастатического колоректального рака.
  • Другие маркеры: mCEA, CA19-9, кальретинин, COX-2, CDH17, CK20, MOC-31 (EPCAM), MUC2, CK7.

Зачастую при раке толстой и прямой кишки бывает важно определить микросателлитную нестабильность и нарушение репарации в четырех генах: MLH1, PMS2, MSH2 и MSH6.

Это помогает в оценке прогноза и диагностике синдрома Линча (наследственного неполипозного рака толстой кишки) — генетического заболевания, при котором у больного с более высокой вероятностью и в более раннем возрасте (средний возраст — 37 лет) развивается рак кишечника, некоторые другие злокачественные опухоли.

Возможны следующие результаты иммуногистохимического исследования на синдром Линча при колоректальном раке:

  • Все 4 белка присутствуют в опухолевой ткани: наиболее распространенная ситуация, встречается у 80% пациентов с раком толстой и прямой кишки. Среди этих больных синдром Линча встречается очень редко.
  • Отсутствует один или более белков: такая ситуация встречается у 20% пациентов. У них высока вероятность синдрома Линча.
  • Отсутствуют белки MLH1 и PMS2: такая ситуация встречается в 15% случаев. У 20% этих пациентов имеется синдром Линча.
  • Отсутствует только белок PMS2, MSH2 или MSH6: встречается в 5% случаев, у большинства этих пациентов имеется синдром Линча.

Иммуногистохимические исследования при меланоме

Онколог назначает иммуногистохимическое исследование, когда обнаружена меланома на любой части тела, пигментированный метастаз, который может иметь отношение к меланоме, пигментный невус (родинка), который внешне очень похож на злокачественную опухоль, но при обычном гистологическом исследовании в нем не удается обнаружить опухолевые клетки.

Исследуют маркеры:

  • Ki-67 — помогает оценить пролиферативную активность опухоли, прогноз.
  • р53 — оценка активности деления клеток.
  • HMB-45 — оценка функции пигментных клеток (меланоцитов).
  • bcl-2 — оценка вероятности того, что опухоль метастазирует.
  • S-100 — высокоспецифичный для меланомы маркер, который помогает отличить ее от доброкачественных образований.

Стоимость анализа в клинике Медицина 24/7

В клинике Медицина 24/7 иммуногистохимические анализы при раке и ряде других заболеваний выполняются методом флюоресцентной гибридизации in situ. Антитела, присоединившиеся к антигенам, дают при осмотре под микроскопом свечение. Цены на иммуногистохимию в нашей клинике представлены ниже.

Материал подготовлен заместителем главного врача по лечебной работе клиники «Медицина 24/7», кандидатом медицинских наук Сергеевым Петром Сергеевичем.

Источники:

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы: анализ и расшифровка

Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.

При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

Для чего используют иммуногистохимию при раке молочной железы

В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:

  • Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
  • Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
  • Первоначальный очаг заболевания.
  • Стадию заболевания (например, степень рака).
  • Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
  • Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.

Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:

  • Иммуногистохимия при раке молочной железына более раннем сроке диагностировать заболевание;
  • выяснить непосредственный очаг заболевания;
  • найти границы заболевания;
  • определить точное место образования;
  • определить точный вид новообразования;
  • определить точную стадию развития;
  • определить рост патологических клеток;
  • узнать реакцию на препараты (в частности, на гормоны, на лучевую терапию и так далее);
  • определить необходимость операции;
  • помогает точно оценить качество лечения.
Читайте также:  Перламутровые, жемчужные папулы на головке полового члена у мужчин: что это такое, как от них избавиться

В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования — это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:

  • при метастазах;
  • при бесплодии;
  • после неудачных попыток ЭКО;
  • при различных заболеваниях матки;
  • при различных видах патологий органов малого таза;
  • при постоянных невынашивания плода;
  • при заболевания эндометрия.

Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.

Как проводится анализ

Иммуногистохимия рака молочной железы по прямому методу проводится в 6 этапов:

  • Врач проводит трепанобиопсию молочной железы. Он берет небольшой кусочек ткани с места предполагаемой опухоли (где пациентка чувствует боль или дискомфорт).
  • Образец ткани направляют в лабораторию, где помещают в формалин. Это нужно для обезжиривания образца.
  • Затем ткань извлекают и окунают в жидкий парафин. Это первый этап в подготовке образца к исследованию под микроскопом.
  • Полученный блок из ткани молочной железы и застывшего парафина разрезают на тонкие кусочки толщиной до 1 мм.

Каждый полученный срез окрашивают антителами. Через определенное время лаборант исследует срез и делает заключение. Время реакции может занимать от 3 часов до 12 дней в зависимости от метода ИГХ.

Какой рак можно вылечить без операции?

Некоторые разновидности опухоли не только не требуют хирургического лечения, но оно им противопоказано, так как может привести к прогрессированию заболевания. Это прежде всего лимфома, опухоль, возникающая из лимфоцитов, которые располагаются как в лимфоузлах, так и в паренхиматозных органах.

Развитие иммуногистохимии и основанных на ее результатах таргетной терапии и иммунотерапии постоянно расширяют спектр видов рака, которые можно вылечить “точечным” воздействием исключительно на опухолевые клетки. Помимо лечения лимфомы, по состоянию на начало 2020 года наибольшее применение методы иммунотерапии и таргетного лечения получили при лечении таких заболеваний, как:

  1. рак молочной железы;
  2. рак простаты;
  3. рак кишечника;
  4. рак легкого;
  5. лимфомы;
  6. рак желудка;
  7. меланома

при которых современные протоколы лечения требуют выполнение иммуногистохимии. Большинство ошибок в диагностике и лечении данных заболеваний связано либо с не проведением иммуногистохимии, либо с ее неправильной интерпретацией.

Цена ошибки, к сожалению, может быть фатальной, так как назначение неправильного лечения может привести к резистентности (устойчивости) опухолевых клеток к лекарственным препаратам, которые при правильном назначении часто приводят к выздоровлению пациента.

Когда нужно делать?

Если симптоматика указывает на развитие злокачественного процесса в молочных железах необходимо сделать иммуногистохимическию процедуру.

Иммуногистохимический анализ показан в следующих случаях:

  • подозрение на рак молочной железы;
  • определение стадии злокачественного процесса;
  • выявление локализации карциномы;
  • постановка степени распространения опухолевых очагов;
  • определение разновидности патологического образования;
  • установление глубины атипии и уровень дифференциации;
  • выбор метода лечения;
  • мониторинг эффективности противораковой терапии.

Когда показано прохождение гистохимии

Данный вид диагностической методики обладает способностью протестировать любые ткани организма человека. Если врач назначает пациентке прохождение иммуногистохимии при раке молочной железы, то решение объясняется следующими моментами:

  1. Необходимо определить нозологическую и гистологическую природу патологического очага.
  2. Требуется установить класс опухоли.
  3. Нужно выявить место расположения первичного образования. Если локализация не выявлена, то его нахождение определяется по отдельному метастазу.
  4. Необходимо определиться с прогнозом дальнейшего течения злокачественного процесса.
  5. Возникает необходимость уточнить либо откорректировать дальнейшую терапию.
  6. Надо подтвердить либо исключить присутствие болезнетворных микроорганизмов.

Помимо этого, иммуногистохимический метод диагностики позволяет:

  • Узнать степень восприимчивости раковых клеток к медикаментам таргетной группы либо химиотерапии.
  • Определить резистентность новообразования к отдельным группам химиопрепаратов (для раковых опухолей МЖ, имеющих рецепторы к эстрогену в схему лечения добавляются гормональные лекарства).
  • Посредством теста на фермент пролиферации узнать степень агрессивности злокачественной опухоли.

Необходимо отметить, данный лабораторный метод назначается не только при онкологии молочных желез — он может быть порекомендован и в тех ситуациях, когда в анамнезе присутствует:

  • Бесплодие.
  • Рак матки.
  • Целиакия.
  • Туберкулез.
  • Гастрит хронической формы.
  • Почечная недостаточность.
  • Болезни репродуктивных органов.
  • Системное заболевание соединительных тканей.

Особенности и значение диагностического метода

Иммуногистохимия – высокоточное микроскопическое тестирование взятого биоматериала, помогающее специалистам обнаружить и провести идентификацию особых веществ, характерных для раковых клеток.

На сегодняшний день гистохимия используется с целью:

  1. Уточнения предполагаемого диагноза.
  2. Установления вида или подвида опухоли.
  3. Определения стадии злокачественного процесса.
  4. Выявления степени распространенности единичного ракового новообразования.
  5. Установления патологического очага, провоцирующего метастазы, если исследуемый образец получен из вторичного злокачественного источника.
  6. Определения особенности ответной реакции на лечение.
  7. Подтверждения результатов предыдущих анализов.
  8. Исключения вероятного присутствия других злокачественных процессов.
  9. Уточнения скорости роста опухоли.

Основная суть иммуногистохимической диагностики состоит в следующем:

  • Изучение клеток биоптата злокачественного новообразования с применением реактивов, содержащих особые белки (или антитела), помеченные специальными веществами, поддающимися детектированию.
  • Иммуноглобулины обладают пространственным строением, которое разрешает им соединяться с отыскиваемым веществом (антигеном) в онкологических клетках. Подобный химический процесс называется «антиген-антитело», позволяющий подтвердить присутствие в исследуемом материале веществ, характерных для рака.

При проведении ИХГ может быть осуществлено выявление отдельных рецепторов к определенным гормонам, как прогестерон, эстроген, а также ферментов интенсивного роста злокачественных клеток, онкологические маркеры и прочие антигены.

Подготовка к исследованию

ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

Показания

Исследование ИГХ назначается, если имеется опасение развития злокачественного образования молочной железы, и преследует цели:

  • обнаружить болезнетворный процесс возможно раньше;
  • выяснить местоположение больных клеток и определить, захвачены ли ими соседние ткани — очертить границы;
  • найти источник метастазов, изначальный очаг болезни;
  • уточнить вид опухоли и стадию ее развития;
  • установить биологический резерв больных клеток: темпы разрастания, быстроту метастазирования; реакцию на гормоны, противоопухолевые препараты, лучевую терапию;
  • определить надобность в хирургическом вмешательстве;
  • оценить эффективность проводимого лечения.
  • Главными достоинствами данного метода является возможность обнаружения больных клеток и опухолевых факторов, чего нельзя достичь при гистохимическом анализе, и вероятность подбора максимально результативного варианта безоперационного лечения новообразований.
  • Противопоказаний данный метод не имеет и не проводится только в случае невозможности забора исследуемого материала (больной ткани).
  • При обследовании пациенток с проблемами репродуктивной сферы, помимо случаев злокачественных новообразований молочной железы, ИГХ будет информативен при онкологических заболеваниях матки и бесплодии.

Показания к исследованию

Этот анализ показан пациентам с подозрением на рак молочной железы или людям, которые испытывают неприятные ощущения или боль при прощупывании сосков. Иммуногистохимическое исследование помогает врачам выявить расположение опухоли. Однако если в организме появились метастазы, иммуногистохимия выявит и их.

Большое преимущество метода – отсутствие противопоказаний. Любой мужчина или женщина может сдать анализ, если переживает из-за неприятных ощущений или болей в груди.

Если опухоль выявлена на раннем этапе (когда она состоит из доброкачественных клеток), пациенту не потребуется операция или вредная для иммунитета химиотерапия. В этом случае достаточно провести курс гормональной терапии.

Положительный исход наступает в 75–80 % случаев.

Этапы проведения иммуногистохимического анализа

В какой период менструального цикла лучше сдавать гистохимический анализ для исследования патологического образования в молочной железе? По мнению специалистов, самым оптимальным временем для проведения процедуры является:

  • 19-22 день месячного цикла при 28-дневном менструальном цикле.
  • 23-26 день менструального цикла при 35-дневном месячном цикле.

В первую очередь осуществляется взятие частицы ткани опухоли, так называемая биопсия, имеющая несколько вариаций своего выполнения. Зачастую требуемый кусочек биоптата извлекается посредством очень тонкой иглы. В отдельных случаях нужный биоматериал берется в ходе хирургического вмешательства после выполнения надреза тканей груди.

Иммуногистохимия молочной железы выполняется поэтапно, в такой последовательности:

  1. Добытый образец материала фиксируется, а для предотвращения его преждевременного высыхания перекладывается в раствор формалина.
  2. Подготовленный биоматериал отправляется на исследование
  3. На данном этапе процедуры исследуемый материал обезжиривается и заливается медицинским парафином.
  4. Затем биоптат нарезается тонкими пластинками толщиной не более 1 мкм, а затем перекладывается на медицинские стекла для исследования.
  5. Подготовленный образец поддается окрашиванию реактивами обусловленной концентрации.
  6. Степень окраски химических реактивов со злокачественными клетками зависит от присутствия определенных рецепторов. Чем ярче получается цвет, тем большее количество рецепторов имеется в исследуемом материале.
Читайте также:  Узнать курит ли подросток сигареты

Сколько ждать результат ИХГ? Сроки выполнения анализа зависят от количества используемых маркеров:

  • Применение до 5 ферментов – в течение 7 дней.
  • Использование более 5 маркеров – не больше 15 дней.
  • При необходимости срочного получения результата – через 3 часа.

Рак молочной железы — комплексный иммуногистохимический профиль — узнать цены на анализ и сдать в Москве

Метод определения гистологическое исследование с окрашиванием гематоксилином-эозином. Иммуногистохимическое исследование с применением моноклональных антител к рецепторам эстрогенов, прогестерона, c-erbB-2 онкобелку и Ki-67 (MIB-1).

Исследуемый материал биоптат опухоли желудка, опухоли молочной железы, фиксированный в забуференном 10% растворе формалина

«Золотой стандарт», комплекс гистохимических тестов, рекомендуемый для уточняющей диагностики, оценки биологического потенциала опухоли, прогноза течения заболевания, подбора индивидуальных схем терапии рака молочной железы (РМЖ).

Исследование экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона

Большинство (75%) раковых опухолей молочной железы являются гормонально-зависимыми, то есть эстрогены и прогестерон оказывают стимулирующий эффект на эти опухоли. Без этих гормонов такие опухоли не могут расти, они уменьшаются в размерах и постепенно погибают.

Эстрогены и прогестерон сами по себе также играют важную роль в формировании некоторых видов РМЖ. Эстрогены являются фактором стимуляции роста и пролиферации клеток, содержащих эстрогеновые рецепторы, в органах женской половой системы и в клетках опухолей молочной железы.

Прогестерон также является фактором, способствующим возникновению онкологической патологии. 

Если раковые клетки на своей поверхности имеют мало эстрогеновых рецепторов (гормонально-негативные опухоли), гормональная терапия не дает какого-либо эффекта.

Однако если при этом на клетках опухоли имеются прогестероновые рецепторы, то гормональная терапия может быть эффективной.

Следует подчеркнуть, что в том случае, когда клетки рака обладают прогестероновыми рецепторами, но не обладают эстрогеновыми, вероятность того, что гормональная терапия будет эффективной, составляет 10%. 

Рецепторы эстрогенов и прогестерона стали одними из первых вошедших в практику клеточных маркеров, роль которых в генезе гормонозависимых опухолей доказана большим количеством исследований.

Определение рецепторов эстрогенов и прогестерона в ткани опухоли сейчас рассматривается как обязательное условие для успешного гормонального лечения РМЖ.

Степень реакции на гормональную терапию также существенно зависит от наличия рецепторов эстрогенов и прогестерона в опухоли: ее эффективность составляет около 10% при эстроген-негативных опухолях, примерно 50% при эстроген-позитивных опухолях и около 75% при опухолях, содержащих одновременно рецепторы эстрогенов и прогестерона. Тем не менее, известны случаи резистентности к гормональной терапии больных с эстроген- и прогестерон-позитивными опухолями, поэтому гормонально-рецепторный статус опухоли оказывается не всегда достаточным показателем гормональной чувствительности РМЖ.

Частота встречаемости гормональных рецепторов на поверхности клеток РМЖ

Около 75% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-позитивными. 

  • Около 65% из этих гормонально-позитивных опухолей имеют на поверхности и прогестероновые рецепторы (прогестерон-позитивные). 
  • Около 25% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-негативными и прогестерон-негативными или имеют неизвестный гормональный статус. 
  • Около 10% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-позитивными и прогестерон-негативными. 
  • Около 5% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-негативными и прогестерон-позитивными. 

В данном контексте «позитивные» означает, что на поверхности клеток имеется значительно число рецепторов, а «негативные» — что число этих рецепторов не так велико. В некоторых случаях лаборатория может дать ответ «гормональный статус опухоли неизвестен».

HER2 статус

В настоящее время рекомендуется исследовать наличие гиперэкспрессии HER2/neu (с-erbB-2) и возможность использования HER2/neu антител для лечения РМЖ как в сочетании c химиотерапией, так и самостоятельно.

Гиперэкспрессия этого гена определяется в ткани опухоли примерно у трети больных РМЖ и ассоциируется с плохим прогнозом и малой чувствительностью к тамоксифену и химиотерапии.

Использование моноклональных антител к HER2/neu (герцептин, транстузумаб) снижает резистентность таких опухолей к определенным видам химиотерапии и значительно повышает процент пациентов, у которых удается добиться ремиссии.

Исследование экспрессии Ki-67 (пролиферативная активность)

Индекс пролиферации опухолевых клеток, который оценивают по экспрессии Ki-67, также рассматривается как прогностический фактор при РМЖ. У низкодифференцированных опухолей пролиферативная активность выше, чем у высокодифференцированных. Около 80% опухолей с гиперэкспрессией HER2/neu имеют высокую пролиферативную активность. 

Сегодня принятым «золотым стандартом» диагностики при РМЖ является комплексное определение чувствительности клеток опухоли к рецепторам эстрогенов и прогестерона наряду с определением герцепт-статуса и пролиферативной активности.

  1. Волченко Н. Н., Франк Г. А. Комплекс морфологических и прогностических факторов при раке молочной железы: Пособие для врачей.- М., 2000.  
  2. Злокачественные заболевания в России в 2011 году (заболеваемость и смертность). — Под редакцией В. И. Чиссова, В. В. Старинского, Г. В. Петровой — М.: ФГБУ «МНИОИ им. П. А. Герцена» Минздрава России. — 2013.- 289 с. 
  3. Иммуногистохимические методы: руководство. Русское издание под редакцией Г. А. Франка и П. Г.Малькова // 2011 – С.91-97 
  4. Состояние онкологической помощи населению России в 2012 году. — Под ред. А. Д. Каприна, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. — М.: ФГБУ «МНИОИ им. П. А. Герцена» Минздрава России, 2013.- 232 с. 
  5. Almasri N.M., Al Hamad M. Immunohistochemical evaluation of human epidermal growth factor receptor 2 and estrogen and progesterone receptors in breast carcinoma//Breast Cancer Res.-2005.-Vol.7(5).-P.598-604. 
  6. Ferlay J., Shin H.R., Bray F., Forman D., Mathers C. and Parkin D.M. GLOBOCAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancer Base No. 10 [Internet]. Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; 2010. Available from: http://globocan.iarc.fr. 
  7. Slamon D. et al. Adjuvant Trastuzumab in HER2-Positive Breast Cancer. N Engl J Med 2011; 365:1273-83. 
  8. WHO Classification of Tumors of the Braest. WHO, Lyon, 2012 
  9. Wolff A.C. et al. American Society of Clinical Oncology/ College of American Pathologists Guideline Recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Testing in Breast Cancer. Arch Pathol Lab Med—Vol. 131, January 2007.

Нмиц онкологии им. н.н. блохина — игх

 Иммуногистохимия является дополнительным методом исследования, применяемым в патологической анатомии при диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований, когда постановка диагноза по гистологическим препаратам не представляется возможной или требуется уточнение клинически важных молекулярных параметров опухоли.

 Данная методика основана на выявлении в анализируемом образце ткани белков, специфичных для того или иного вида клеток, что позволяет отличать один вид опухоли от другого, а также выявлять маркеры, отвечающие за лекарственную чувствительность опухолевой ткани.

Зачем нужна иммуногистохимия, если уже сделано гистологическое исследование?

 В ряде случаев проведения обычного гистологического исследования биопсии бывает недостаточно, что объясняется следующими причинами:

  • опухоль имеет крайне неспецифичное микроскопическое строение, которое не позволяет поставить окончательный диагноз.

 Например, диагноз практически всех лимфом и лейкозов (более 70 видов!) ставится после ИГХ исследования, а в части случаев дополнительно требуется молекулярно-генетическое исследование; в свою очередь, за гистологическим диагнозом «мелкокруглоклеточная опухоль» может скрываться до 13 различных злокачественных опухолей, каждая из которых имеет свой прогноз и требует индивидуального плана химиолучевого лечения – единственным методом, способным помочь врачу в дифференцировании этой группы опухолей, является ИГХ исследование.

Сроки выполнения ИГХ исследования

В соответствии с п.24 Приказа №179н от 24.03.2016 г. Минздрава России, срок выполнения ИГХ исследования:

  • с использованием до 5 маркеров включительно – не более 7 рабочих дней,
  • с использованием более 5 маркеров – не более 15 рабочих дней.

Возможности ИГХ исследования

1. Диагностика:

  • окончательное (реже промежуточное) установление диагноза опухолевого процесса (различные варианты рака, саркомы мягких тканей, меланома, типирование лимфом и лейкозов),
  • уточнение степени злокачественности опухоли (напр., нейроэндокринной опухоли), что будет определять прогноз заболевания,
  • дифференциальная диагностика опухолей и неопухолевых процессов,
  • определение органной принадлежности метастаза с неизвестной первичной локализацией (применимо не для всех опухолей!),
  • дифференцирование множественных опухолевых процессов (наличие у пациента 2 и более разных опухолей).
  • рецепторы стероидных гормонов (рецепторы эстрогенов, рецепторы прогестерона, рецепторы андрогенов) – рак молочной железы, рак тела матки (эндометрия), другие опухоли;
  • белок Her2/neu — рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря;
  • рецепторы соматостатина 2А и 5 типов – нейроэндокринные опухоли (карциноиды);
  • PD-L1 – немелкоклеточный рак легкого, беспигментная меланома, другие опухоли;
  • ALK — немелкоклеточный рак легкого;
  • ROS1 — немелкоклеточный рак легкого;
  • микросателлитная нестабильность (MSI) – рак толстой кишки, другие опухоли;
  • индекс пролиферативной активности (Ki-67) – различные виды злокачественных опухолей.

 Пациенты, не находящиеся на госпитализации в стационарах НМИЦ онкологии, могут узнать о стоимости ИГХ исследования в регистратуре патологоанатомического отделения (4 этаж, каб. №12).

Если у меня есть полис ОМС, должен ли я платить за иммуногистохимическое исследование?

 Для всех пациентов, находящихся на госпитализации в стационарах НМИЦ онкологии и получающих медицинскую помощью по ОМС или ВМП (высокотехнологичная медицинская помощью), ИГХ исследование выполняется бесплатно. Необходимым условием выполнения бесплатного исследования является нахождение пациента на госпитализации в  стационаре на момент оформления ИГХ.

 Во всех остальных случаях ИГХ исследование выполняется за счет личных средств пациента.

 За более подробной информацией рекомендуем обращаться в вашу страховую компанию.

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock
detector